Was ist Peptid-Reinigung?

Peptide sind die kleinen Polymer-Plastiken, die aus Aminosäuren bestehen. Viele sind als Hormone, Giftstoffe biologisch-aktiv oder haben andere Fähigkeiten. Solche Mittel werden häufig in der biologischen, medizinischen und chemischen Forschung benutzt. Sie dienen auch als die Bausteine der Proteine, wenn Zahlen von ihnen zusammen verbunden werden. Peptidreinigung ist eine Technik, die entweder an gewöhnt ist, reinigen große Mengen eines gewünschten Peptids oder den unterschiedlichen Peptiden zu helfen, die von der Verdauung der Proteine erzeugt werden.

Die Reinigung der Peptide wird vollendet, indem man eine Technik der Chromatographie, eine Weise des Trennens der Mittel verwendet, die differenzial an eine körperliche Matrix binden. Flüssige Hochdruckchromatographie (HPLC) ist für Peptidreinigung allgemein verwendet. Das Peptid oder die Peptide werden in einer Mischung der Lösungsmittel aufgetragen, die im Laufe der Zeit ändert, während sie über eine Spalte der kleinen Korne am Hochdruck gepumpt werden. Verschiedene Peptide eluieren an unterschiedlichen Zeitpunkten und werden durch einen Monitor, häufig ein UVspektrofotometer ermittelt.

Wenn sie Forschung auf Peptiden leitet, häufig ist die Substanz des Interesses selten und kann nicht von den chemischen Firmen gekauft werden. Wenn die Struktur des gewünschten Peptids bekannt, chemisch sich vorzubereiten ist häufig einfacher, durch Peptidsynthese als, das Mittel von den natürlichen Quellen zu lokalisieren. Naturproduktlokalisierung ist notorisch schwierig. Synthetische Peptide werden im Allgemeinen von HPLC gereinigt.

Solche chemische Synthese kann für einen unabhängigen Forscher erschreckend sein, der nicht ein Chemiker ist. Häufig wird Vertrag dieser Aufgabe heraus zu den Peptidsynthesefirmen abgeschlossen, die auf diese Techniken sich spezialisieren. Dieses kann als versuchend ökonomischer sein, das System vom Kratzer in einem Labor zu gründen. Peptidfirmen können die kundenspezifischen Peptide bilden, die zu den Notwendigkeiten des Forschers hergestellt werden.

Ein anderer Grund für Peptidreinigung kann sein, wenn ein Forscher hat ein Protein gereinigt und versucht, seine Identität festzustellen. Er oder sie können das Protein in Peptidfragmente vermindern, die Fragmente durch Reinigung trennen, und das Zerteilungmuster der Peptide haben, die durch ein Massenspektrometer ermittelt werden, während sie von der Spalte eluieren. Diese Technik bekannt als LC-MS, Kurzschluss für flüssige Chromatographiemasse Spektrometrie. Sie gibt das Molekulargewicht und die Aminosäurestruktur der Fragmente und ermöglicht häufig der Kennzeichnung der Proteine, wenn die ähnliche oder identische vorher gekennzeichnet worden sind.

Viele Forscher arbeiten mit Peptiden, die die neuen Eigenschaften, wie unnatürliche Aminosäuren, um eine mit ungewöhnlichen biologischen Tätigkeiten zu versuchen und zu finden haben. Es gibt ein vollständiges Feld, das das peptidomimetics genannt wird, das der Studie solcher neuen Peptide gewidmet wird. Häufig sind computererzeugte Reihenfolgen entworfen, und eine Peptidbibliothek wird synthetisiert, die eine Strecke der atypischen Peptide umgibt. Peptidreinigung wird verwendet, um individuelle Mitglieder dieser Bibliothek zu trennen, um reines Peptid zur Verfügung zu stellen, um auf biologische Tätigkeit zu prüfen. Diese Strategie ist erfolgreich gewesen, wenn sie mindestens eine neue handelsübliche Droge erzeugte.

Viele der biologisch-aktiven Peptide sind vom Interesse für medizinischen Gebrauch. Die Mittel, die Handels-, wie Insulin benutzt werden, werden allgemein durch recombinant DNAoverexpressionsysteme produziert, die große Mengen des gewünschten Mittels erzeugen. Häufig die Peptide werden genetisch ausgeführt, um Reinigung zu erleichtern indem man irgendeine Art des Umbaus hinzugefügt ihren Frontseiten hat. Dieses erlaubt den Gebrauch von Affinitätschromatographie, das Peptid zu reinigen.

Mit dieser Art der Chromatographie, ist der Umbau ein Mittel, wie Histidin, das eine Matrix der Korne, wie das Nickel bindet, gewählt, damit seine Fähigkeit den Umbau bindet. Unerwünschte Proteine und Peptide überschreiten im Allgemeinen durch die Spalte, ohne zu binden. Das spezifisch entworfene Peptid bindet normalerweise stark an die Spalte. Nach den verschmutzenproteinen und den Peptiden sind weg, das gewünschte Peptid wird eluiert durch ein Mittel gewaschen worden, das für das Binden zur Matrix konkurriert. Ein hat dann eine ziemlich reine Vorbereitung des gewünschten Peptids, und der Umbau kann durch Spaltung entfernt werden.